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微生物這些事

發(fā)布時間:2015-9-18  點擊:2282次

和微生物“打交道”也算是有好幾年的時間,從剛開始知其不多到現(xiàn)在具有豐富微生物知識的技術(shù)檢驗人員,對于微生物也甚是喜愛,因為它不單單是人們說的細(xì)菌而已,而是包含著各種各樣的“小生命”,可謂是豐富多彩,包含的種類有病毒、細(xì)菌、螺旋體、支原體、立克次體、衣原體、真菌和原蟲等。并且它也不是只有害處,其中絕大數(shù)微生物的存在對人類和動、植物有益無害,而且有些是必需的。如絕大多數(shù)抗生素是微生物的代謝產(chǎn)物,還能利用微生物來制造一些維生素、輔酶、ATP、激素和細(xì)胞因子。

作為臨床檢驗分支之一的臨床微生物學(xué)實驗室主要研究感染性疾病的病原性微生物檢查。每天微生物學(xué)實驗室都會接收或多或少臨床送來的病人標(biāo)本,有患有肺部疾病患者的痰液,創(chuàng)傷患者的分泌物,泌尿系感染患者的尿液,此外還有血液、糞便、乳腺分泌物、引流液等,然后由我們微生物室人員對接收的標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)。通過培養(yǎng)板上的細(xì)菌菌落形態(tài),大小,色素等初步判斷是何種菌,再對其進(jìn)行鑒定和藥敏試驗,最后根據(jù)其檢驗特點和臨床要求初步判斷和確定診斷。

微生物的檢驗的方法有直接涂片鏡檢(如一般細(xì)菌、淋球菌、抗酸桿菌涂片等)、檢測特異性抗原或病原體成分(如衣原體和支原體)、進(jìn)行分離培養(yǎng)和鑒定、體外藥敏試驗等。微生物檢驗具有重要的臨床價值,其主要的臨床應(yīng)用有:

1)為臨床感染性疾病的診斷提供病原學(xué)依據(jù)。

2)為臨床感染性疾病的治療提供參考用藥的信息。

3)為醫(yī)院感染提供病原微生物及其耐藥性動態(tài)信息。

4)改進(jìn)或更新臨床微生物檢驗的方法。

此外,近年來臨床微生物實驗室也開展血漿/血清(1,3-β-D葡聚糖檢測,簡稱G試驗。由于深部真菌感染的發(fā)病率隨著廣譜抗生素和免疫抑制劑的應(yīng)用呈逐年上升態(tài)勢,而深部真菌感染的早期診斷對其治療具有重要的作用,然而傳統(tǒng)真菌培養(yǎng)法時間長、陽性率低且無法進(jìn)行定量分析等缺點。其中(1,3-β-D葡聚糖是真菌細(xì)胞壁上的特有成分,占真菌細(xì)胞壁成分 50%以上。除結(jié)核桿菌和隱球菌外,所有真菌細(xì)胞壁上均含有(1,3-β-D葡聚糖。當(dāng)真菌進(jìn)入人體血液或深部組織后 ,經(jīng)吞噬細(xì)胞的吞噬、 消化等處理后,(1,3-β-D葡聚糖可從胞壁中釋放出來,從而使血液及其他體液中(1,3-β-D葡聚糖含量增高。而在淺部真菌感染中,(1,3-β-D葡聚糖未被釋放出來,故其在體液中的量不增高使血液中含量增高。因此,G試驗的檢測值可有助于鑒別真菌侵襲與定植。

1,3-β-D-葡聚糖的檢測對真菌感染具有重要的參考價值,主要有:

1)用于深部真菌感染的早期診斷:已有多項研究發(fā)現(xiàn)(1,3-β-D-葡聚糖的水平在深部真菌感染的早期感染可顯著升高,因此, 1,3-β-D-葡聚糖對深部真菌感染的早期診斷具有重要的參考價值,有利于臨床快速發(fā)出報告,使患者能夠在短時間內(nèi)得到積極有效的治療;

2)用于深部真菌感染患者的療效評價指標(biāo):應(yīng)用抗真菌藥物后,定期檢測血漿中BG濃度變化,可協(xié)助臨床醫(yī)師及時進(jìn)行藥物種類及劑量的調(diào)整,也用來判斷藥物的療效;

3)對肺孢子肺囊蟲感染也具有重要的意義。此外不同的(1,3-β-D-葡聚糖檢測值可反映不同真菌菌種感染等。

然而G試驗的干擾因素較多從而使結(jié)果存在假陽性或假陰性,其中可造成G試驗假陽性的原因有:

1)污染,如無熱源的試管、 槍頭等受污染;

2)使用纖維素膜進(jìn)行血液透析,標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料中;

3)靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品; = 4 \* GB3 使用多糖類抗癌藥物;

4)放療和化療造成的黏膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等;

5)服用多黏菌素 B、厄他培南、頭孢噻肟 、頭孢吡肟、注射用氨芐西林鈉舒巴坦鈉、磺胺等藥物。;

6)某些細(xì)菌敗血病患者 。

G試驗假陰性的主要原因有:

1)新型隱球菌產(chǎn)生葡聚糖較念珠菌和曲霉菌少,而曲霉菌感染時葡聚糖水平上升的程度與宿主的免疫力和病原體的數(shù)量有關(guān),只要霉菌被厚壁的纖維組織包繞,葡聚糖就很難再進(jìn)入血液中;

2)進(jìn)行真菌培養(yǎng)前已經(jīng)進(jìn)行抗真菌治療 ;

3)定植菌感染;

4)局灶性曲菌病,(1,3-β-D-葡聚糖很少釋放入血。

G試驗做起來雖然很簡單,但小小的誤差對它都會有很大的影響。標(biāo)本采集前患者的狀態(tài),試驗過程中的操作(如槍頭或標(biāo)本受到污染,加樣時一不小心使反應(yīng)管內(nèi)的液體產(chǎn)生氣泡,或加樣稍有不準(zhǔn)等)都會使檢測結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。因此在操作時要嚴(yán)格按說明書進(jìn)行試驗,以確保實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確。G試驗作為一種新的診斷深部真菌感染 的無創(chuàng)檢測手段,有著高靈敏度和高特異性的優(yōu)點,能夠作為高度懷疑深部住院患者的初篩診斷方法。

如今,隨著計算機技術(shù)的發(fā)展,微生物檢驗基本實現(xiàn)微生物檢驗自動化系統(tǒng)和微生物自動鑒定和藥敏儀。此外,自動的血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)也具有較好的陽性檢出率,且靈敏度高,重復(fù)性好,操作簡便等。隨著這些技術(shù)的發(fā)展,臨床微生物檢驗一定會有更大的進(jìn)步。(檢驗科 楊小蘭)


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